猫疱疹病毒和猫泛白细胞减少症混合感染的诊断

摘要：
    猫细小病毒（Feline parvovirus, FPV）、猫杯状病毒（Feline calicivirus, FCV）和猫疱疹病毒（Felineherpesvirus, FHV）是小动物临床诊疗中较为常见的传染性病毒，多发于幼龄动物，在多猫环境中极易出现交叉感染；本文所述为8只成年猫组成的多猫家庭，其中1只猫因尿闭于医院输液一周后出现打喷嚏、流鼻涕等呼吸道症状，回家后次日其余7只猫均出现相同症状；之后，病情进一步发展为高热、呕吐以致食欲废绝，在外院先后被诊断为猫传染性鼻支气管炎或猫杯状病毒感染， 在一只猫出现死亡后来我院就诊；综合病史、临床症状以及血常规、猫三联抗体、猫细小病毒荧光定量PCR等检查结果，最终确诊为猫疱疹病毒和猫瘟混合感染。

关键词：猫瘟；猫杯状病毒；猫疱疹病毒；PCR
    Interpretation of felinelaboratory test report
    Diagnosis of co-infection with feline herpes virusand feline pancytopenia.
    LI Haoyun, LYU Yanli, XIE Qibao
    China Agricultural UniversityVeterinary TeachingHospital, 100193
    Abstract
    The felineparvovirus (FPV), feline calicivirus (FCV) and feline herpes virus
(FHV) arethe most common infectious viruses in the clinical diagnosis of small
animalsin China, which always occur in young animals, easily to get
cross-infection ina multi-cat environment. This case, consisting of a multi-cat
family by 8 adultcats, came from our hospital. One of the animals gotrespiratory
symptom likesneezing, runny nose and tears after one-week treatment for anuria
inotherhospital. The otherseven cats put up with similar symptom after the day
thefirst one came back. They were diagnosed as feline viral rhinotracheitis
orinfection of FCV in other hospital. As the symptom getting more serious, they
weregiven referral to our hospital. Comprehensively considered with the
medicalhistory, clinical symptoms and laboratory test, they were eventually
diagnosedas coinfection with feline herpes virus and feline plague.
    Key words：Panleukopenia;FCV; FHV; PCR
    2017年6月初，我院接诊2只临床症状为打喷嚏、流鼻涕、流眼泪、流涎、且因食欲废绝而插鼻饲管饲喂的病猫，其中1只精神高度沉郁，呼吸急迫。患猫在外院被诊断为鼻支或FCV感染，同群饲养的猫已经死亡2只，来我院就诊的当天又死亡1只。综合病史、临床症状和实验室检查结果，最终确诊为FHV和FPV混合感染。报告如下:

1. 既往病史
    猫主人共养8只猫，年龄在7-8岁，均未免疫疫苗。1个月前（5月1日），其中一只名为黑黑的猫因尿闭到当地医院输液治疗，1周后（5月7日）出现打喷嚏，流鼻涕等症状，次日家中另外7只猫均出现类似症状，去当地医院被诊断为“鼻支”，给予抗生素和干扰素治疗。又过1周（5月13日），猫只陆续出现饮食欲下降至不食等病状，部分猫只出现发热症状，因治疗效果不佳，10 d后（5月24日）来北京某宠物医院住院治疗。住院后，所有猫进行了猫瘟胶体金试纸条检测；采用biogal公司生产的FPV、FCV和FHV三联抗体检测试剂盒进行了抗体检测，此外还进行了血常规和生化、X线片等影像学检查，综合诊断，确定该猫群为FCV感染。于5月30日和6月5日，病情严重的两只猫相继死亡。

2. 临床和实验室检查
    由于猫群出现猫只死亡和病猫呼吸道症状无明显好转，6月7日起，宠物主人先后几次带部分猫（多多、黑黑和兽兽）来我院进行了诊疗。来我院首诊时，名为多多的猫，精神高度沉郁，水合状态差，流脓涕，呼吸急迫，带鼻饲管，主诉鼻饲时有呕吐症状；血常规结果显示，白细胞数量极少（0.17×109/L，参考范围2.87-17.02×109/L），结合临床症状和既往诊断，对其进行了FPV和猫支原体(Mycoplasma felis, MF) PCR检测，检测结果显示，FPV-PCR结果为阳性（+），MF-PCR结果为阴性（-），由此确诊该患猫有FPV感染（表1），该病猫于当天晚上死亡。名为黑黑的猫精神状态尚可，鼻饲不吐，有脓涕，血常规显示，白细胞总数升高；外院X线片显示，肺部无明显异常，未作其它检查，继续给予抗菌素和猫干扰素对症治疗。6月9日，猫主人带黑黑和兽兽复诊，并带来了外院的三联抗体检测结果。由于持续表现呼吸道症状，对患猫进行了呼吸道疾病相关的重要病原FCV、FHV和MF及猫衣原体(Chlamydophila felis, CF)PCR检测，结果显示，两只猫FHV检测均为阳性，而FCV、MF和CF检测结果均为阴性；对兽兽同时进行了血常规和猫三联抗体检测，血常规结果未见明显异常，而FPV，FCV和FHV抗体效价均很高。6月28日对兽兽和黑黑再次进行了三联抗体检测，各项抗体指标均达到可检测值的最高值。见表2（检测结果S1~S6代表FPV，FCV和FHV的抗体滴度。FPV抗体滴度：S1=1:20，S2=1:40，S3=1:80，S4=1:160，S5=1:320，S6=1:640；FHV抗体滴度：S1=1:4，S2=1:8，S3=1:16，S4=1:32，S5=1: 64，S6=1:128；FCV抗体滴度：S1=1:8，S2=1:16，S3=1:32，S4=1:64，S5=1:128，S6=1: 256）
    表1  呼吸道重要病原的鉴别诊断

    表2  不同采样时间，猫三联抗体检测结果

3. 综合诊断
    由于病程长，病情复杂，我们收集了病猫的病史资料和所有检查、检测结果进行了综合分析，最终确认该猫群为FHV并发FPV感染。

4. 病情分析与讨论
    本群8只猫在发病后被第一家医院根据临床症状诊断为猫传染性支气管炎；第二家医院诊断为猫杯状病毒感染，而最终被确诊为FHV和FPV混合感染。由于未及时做出准确诊断，延误了病情，导致了病程延长，3只猫死亡。综合分析解读诊疗过程中的各个检测结果，对今后的类似疾病的诊断有重要指导意义。

4.1  关于猫瘟的诊断
    本次疫情发生后，前期没有确诊猫瘟的原因有2个。第一，发病过程中，主治医生忽视了2个重要因素，其一，白细胞总数，5月25日的血常规检查结果显示，8只猫中有两只猫的白细胞总数明显下降，分别为黑黑2.68 x 109个/L和猫猫3.89 x 109个/L（参考范围5.5-19.5x 109个/L），FPV抗体检测结果高低不一(表3)，而黑黑和猫猫均有一定滴度的FPV抗体，滴度分别为S4（1:160）和S2（1:40），结合体温升高，厌食和呕吐等临床症状，对于未注射疫苗的猫来说，即使未检测到病毒，也应高度怀疑有猫瘟发生[1]。类似该种情况在临床上时常发生，当有其他并发症状时，极易被忽视。针对这种情况，可采取两种措施，其一，按照猫瘟的治疗原则制定防治方案[2]；其二，选择更敏感的检测方法检测FPV,如PCR技术就是针对病毒基因型进行的高敏感度和高特异性的检测技术。10天后，我们按照这一原则，在发现白细胞数量显著减少时，通过PCR技术检测了FPV，从而确诊了猫瘟。
    表3 发病18天后（5月25日），8只猫的三联抗体检测结果

4.2   关于猫呼吸道传染病的诊断和鉴别诊断
    猫传染性呼吸道疾病的常见病原体包括FHV、FCV和MF等，这些病原引起的疾病有类似的临床症状，需要进行实验室检测方可确诊病原。本次发病过程中，当地的宠物医院初次诊断猫群的疫情为猫传染性鼻支气管炎，但缺乏病原学检测结果的支持，无法确诊疫情。第二家宠物医院虽然做了较为全面的实验室检查，但仍没有进行呼吸道相关病毒的病原检测，而以一次抗体检测结果作为确诊FCV感染的依据，显然，检测报告的解读不准确。我们根据临床病征，对部分猫进行了与呼吸道感染相关的重要病原的PCR检测[3,4,5]，确诊有FHV感染，而排除了FCV、MF和CF感染（见表1），结合发病过程和发病前的抗体检测结果（表2），确诊了FHV为本次呼吸道感染的原发病因之一。

4.3   猫三联抗体检测结果对诊断的指导意义
    对病猫多次三联抗体检测结果进行综合分析对确诊本次疫病意义重大。抗体数据包括本次呼吸道症状出现18天后（5月25日）全群8只猫和之后部分猫的检测结果，同时还与半年前（2016年11月26日）黑黑的三联抗体检测结果进行了比较。对于未注射疫苗的猫群来说，在发病18天后的抗体检测结果中（表3），FPV高低不一， FHV一致很低，结合临床症状，可以初步判断，近期有FPV 感染和可能有FHV感染；结合黑黑半年前和发病后期的抗体检测结果（表2），半年前无FPV抗体和发病1个月后，抗体滴度达到检测上限（S6，1:640），可以确诊近期有FPV感染；同理，观察抗体滴度的变化也可得知，本次疫情与FHV感染有关。通常认为，抗体滴度在感染/发病2周内有4倍升高，即可说明近期有病原感染，而猫群在本次发病过程中，抗体滴度有8倍以上的升高，足以说明近期有FPV和FHV的感染[6,7,8]。黑黑的三次检测结果和猫群在发病后18天的检测结果中FCV抗体效价均处于检测值的上限，说明猫群曾经感染过FCV，而本次疫情与FCV感染无关。

5.治疗效果
    由发病51天时黑黑和兽兽的抗体水平（见表2）可见目前患病动物体内的FPV和FHV抗体均已升到较高水平，随后又根据症状进行了适当的支持治疗，目前患病动物均已康复。

6.小结
    从本次病例的诊断过程看出，对于传染性疾病的诊断，选择适当的检测项目进行检测并根据患病动物的临床症状正确解读检测结果是准确诊断疾病的保证。

参考文献
[1] Mrcvs F A B D. Infectious Diseases of the Dogand Cat; 4th Edition ‐ by Craig
E. Greene[J]. Journal of Small AnimalPractice, 2014, 55(2):E4-E4.
[2] Truyen U, Addie D, Belák S, et al. Felinepanleukopenia. ABCD guidelines on
prevention and management[J]. Journal ofFeline Medicine & Surgery, 2009,
11(7):538-546.
[3] Ruch-Gallie R A, Veir J K, Hawley J R, et al.Results of molecular diagnostic
assays targeting feline herpesvirus-1 andfeline calicivirus in adult cats
administered modified live vaccines[J].Journal of Feline Medicine & Surgery,
2011, 13(8):541-5.
[4] Wang J, Liu L, Wang J, et al. RecombinasePolymerase Amplification Assay-A
Simple, Fast and Cost-Effective Alternative toReal Time PCR for Specific
Detection of Feline Herpesvirus-1[J]. Plos One,2017, 12(1):e0166903.
[5] Fernandez M, Manzanilla E G, Lloret A, et al.Prevalence of feline
herpesvirus-1, feline calicivirus, Chlamydophila felis andMycoplasma felis DNA
and associated risk factors in cats in Spain with upperrespiratory tract
disease, conjunctivitis and/or gingivostomatitis.[J]. Journalof Feline Medicine
& Surgery, 2017, 19(4):461.
[6] Digangi B A, Levy J K, Griffin B, et al.Effects of maternally-derived
antibodies on serologic responses to vaccinationin kittens.[J]. Journal of
Feline Medicine & Surgery, 2012, 14(2):118-23.
[7] Jakel V, Cussler K, Hanschmann K M, et al.Vaccination against Feline
Panleukopenia: implications from a field study inkittens.[J]. Bmc Veterinary
Research, 2012, 8(1):62.
[8] StuetzerB, Hartmann K. Feline parvovirus infection and associated
diseases.[J].Veterinary Journal, 2014, 201(2):150-155.