一例犬传染性肝炎的诊疗

    犬传染性肝炎是由腺病毒I型（CAV1）引起的一种急性、高度接触性、败血性传染病。临床上以高热、嗜睡、呕吐、出血性腹泻、腹痛、癍/点状出血和呼吸急迫等，偶尔伴有黄疸和角膜水肿（“蓝眼症”）为特征。各年龄犬均可发生，但多发生于未免疫的幼犬。本文根据病史、临床症状和全面的实验室检查对一只四月龄幼犬进行诊断，确诊其为传染性肝炎。现将诊疗情况报告如下。

1.病史
    四月龄雄性可卡（棕色）犬，体重5.1Kg，未免疫。主诉，就诊前3天开始精神沉郁，食欲下降，呕吐且呕吐物带血，体表温度（腋下）40.5℃，且高烧不退。发病前曾食用骨头；发烧后服用中药感冒冲剂，但病情没有好转并且体况愈发虚弱，站立不稳。在外院检查结果包括犬细小病毒（CPV）阴性（-）、犬瘟热（CDV）阴性（-）、粪便寄生虫阴性（-）。病犬于2015年11月15日来中国农业大学动物医院就诊。

2.临床症状
    病犬就诊当日（发病第4天，D4）精神极度沉郁，站立不稳，食欲废绝，高温（腋下温度40℃），牙龈出血，右眼结膜和双侧内耳廓均有出血点，尿液呈黄色；就诊第三日（发病第6天，D6），精神好转，有少量食欲，全身皮肤瘙痒，腹部皮肤散在出血癍点；第四日（D7），精神食欲进一步好转，皮肤出血状况未加重，但出现羞明流泪，眼角处有浆液性分泌物（图1），左眼出现角膜混浊（图2），第5日（D8）左眼角膜浑浊程度加重呈蓝色（图3），但随后几日逐渐消退；就诊后第6日（D9），右眼出现了类似左眼的角膜浑浊症状，症状变化过程与左眼相同。

    图1.D7日左眼羞明流泪

    图2.D7日左眼角膜轻度浑浊

    图3. D8日角膜水肿程度加重，呈蓝色

3.实验室检查
    我教学动物医院检验中心对该犬进行了血液常规和血清生化检验、犬三联抗体检测、犬巴贝斯虫检查、钩端螺旋体PCR检测和犬特异性脂肪酶（CPL）检查；中国农业大学动物医学院临床微生物实验室采用二重PCR方法对病犬血液样本进行了CAV1和CAV2检测，并将PCR产物送奥美德诺（北京）基因科技有限公司测序；期间采集相关样本进行CPV2 PCR和CDV RT-PCR测定。

3.1血液常规检查
    治疗过程中进行了数次血常规检查，部分血常规检查结果见表1，具体为发病的第4天（D4），第5天（D5）、第8天（D8）、第11天（D11）、和第13天（D13）天。从表中看出，病犬在就诊的最初两天（D4，D5），红细胞和血小板进行性减少，网织红细胞下降，然后逐渐上升，白细胞总数无明显变化。
    表1 血常规检查结果

3.2 生化检查
    在发病的D5，D9，D16，D23采集患犬外周血血清进行了生化检查。结果显示，发病后第五天，血清中出现ALT、AST和ALP、LDH等与肝脏的酶的活性明显升高，同时出现了高胆红素、低蛋白血症状况，提示存在肝细胞损伤或坏死。在随后的检查中，各项指标逐渐恢复，这一阶段病犬的体况逐步好转。
    表2 病犬血清生化检查结果

3.3 特异性脂肪酶检查
    在D5（就诊第二日）对病犬的特异性脂肪酶（CPL）进行了检测，结果为CPL异常，提示患犬存在胰腺炎症。

3.4犬瘟热、犬传染性肝炎和犬细小病毒三联抗体检测
    于D5和D14，采用以色列BIOGAL公司生产的三联抗体试剂盒对患犬进行了犬瘟热、犬细小病毒和犬传染性肝炎抗体滴度检测，见表3，结果显示。未免疫的四月龄幼犬CAV1抗体显著升高而CDV和CPV抗体滴度极低，提示病犬存在CAV1感染。
    表3 三联抗体检测结果

3.5 病原学检测
    于D5（就诊的第二天）采集血液样本进行CAV1 和CAV2双重PCR鉴别检测，结果为CAV1阳性（+），CAV2阴性（-），将CAV1阳性PCR扩增结果进行序列测定，并与GenBank中的CAV1全基因组序列比对，同源性高达99%，从而确定待检样本中存在CAV1病毒；采集目标组织样本进行CDV
RT-PCR，CPV2和钩端螺旋体PCR及巴贝斯虫检测，结果均为阴性。

4.诊断
    通过上述病史调查、临床症状和生化检测结果分析，怀疑患犬可能感染CAV1；而CAV1抗体水平明显升高和血液PCR检测和序列测定与分析结果表明患犬感染了CAV1病毒；治疗过程中患犬出现了“蓝眼”病症为传染性肝炎的特征性表现。

5.治疗
    本病的治疗原则：对症治疗和控制继发感染相结合。必要时实施CAV1特异性抗血清治疗。该犬在治疗过程中采用了退烧、保肝、调解电解质和水平衡、控制继发感染等综合措施。
    初诊当日，赛福魁0.55ml、痛立定0.4ml皮下注射，复方生理盐水240ml、25%葡萄糖20ml，CoA25u和ATP10mg混匀静脉滴注，止血敏0.5ml（62.5mg）皮下注射。次日输血160ml、静脉滴注肝复肽10mg，其余同第一天。第三日以后，在控制继发感染和补充体液及保肝的基础上，配合使用了犬用干扰素α。第四日病犬体况明显好转，但角膜水肿的症状呈迅速出现、很快消退的现象，左右眼未同时发生，从开始到消退的过程约为一周。
    治疗一周后精神及饮食欲恢复正常，医嘱此后连续两周每周复诊一次。

6.讨论
    近年来，尽管随着疫苗免疫密度的增加，发生典型犬传染性肝炎的病例越来越少，但临床上亚临床或隐性感染时有发生。由于本病与犬细小病毒和犬瘟热病毒感染有相似的临床症状或常常混合感染，而临床缺乏有效的快速诊断手段，漏诊情况非常常见。本病例为未注射疫苗的幼犬，出现了数日的高热不退、呕吐和腹泻且粪便带血等症状，且在发病过程中出现了皮肤和黏膜等部位出血以及进行性贫血的情况，为此进行了CAV1与CDV、CPV2、CAV2、钩端螺旋体和犬巴贝斯虫的鉴别诊断，并最终确诊为犬传染性肝炎。后期出现的“蓝眼”症状属本病亚临床感染的典型症状[1,
2]。
    就诊过程中出现的牙龈、耳廓等处出现出血斑点，与血常规检查中血小板的变化规律一致，随着血小板数量的增加，出血状况得以控制。生化检查结果表明病犬存在肝细胞损伤（或坏死），因此，患犬的出血还可能与肝损伤引起的凝血因子减少或功能下降等情况有关[2]。
    本报告从病原和血清学两方面确诊患犬为传染性肝炎。PCR检测和PCR产物序列分析表明，患犬血液中存在CAV1野毒，并排除了PCV2、CDV、CAV2和钩端螺旋体。试验采用BIOGAL公司生产的三联抗体检测试剂盒对血清中犬传染性肝炎和犬瘟热、犬细小病毒抗体进行了测定，结果显示，血清中出现了高滴度CAV1抗体，且随着时间的延长，抗体滴度轻度升高，但犬瘟热和犬细小病毒抗体水平都很低，表明患犬存在CAV1野毒感染，因为该患犬为未免疫的幼犬，四月龄时母源抗体已经消失。据文献报道[2]，犬传染性肝炎潜伏期5~9天，抗体可在感染后5天产生，据此推断，首次抗体检测时，病犬至少已经感染病毒10天，因此，血清中高滴度抗体是因感染CAV1而产生。
    由于患犬就诊早期出现了进行性贫血的状况，因此，在就诊的第二天对患犬实施了输血治疗，这对病犬的康复起到了积极的作用。因为，一方面，输血对病犬的红细胞和血小板进行了有效地补充，另一方面，供血犬都实施了疫苗免疫注射，血清中含有包括传染性肝炎特异性抗体在内的高浓度的免疫球蛋白，这对清除循环血液中的病毒有重要作用。
    本病例的病史和临床症状与临床常见的犬细小病毒病、犬瘟热等极为相似，通过病原和血清抗体检测最终确诊为犬传染性肝炎，这一结果提示，对于高热不退伴有严重的消化系统疾病的未免疫幼犬，在排查CPV2和CDV等疾病的同时还应排除CAV1感染。

参考文献
[1] C.E.Greene，Ed. Infectious Diseases of  the Dog and Cat，4th ed.，[M]. Saunders-Elsevier， 2012:42-29.
[2] Jane E.Sykes.Canine and Feline infectious diseases，[M].Saunders-Elsevier，2014:82-186.