犬埃利希体病(canine Ehrlichiosis)是埃利希体属多个成员引起的临床和亚临床感染,其中以犬埃利希体感染最常见,也最为严重,主要以呕吐、黄疸、进行性消瘦、脾肿大、眼部流出黏性脓性分泌物、畏光和后期严重贫血等为特征。幼犬致死亡率较成年犬高。
1935年Donatien寺在阿尔及利亚首次发现本病,1945年德国Moshkovshi又将其命名为犬埃利希体病。以后非洲南部和北部、叙利亚、印度和美国均报道发生此病。我国1999年于军犬中发现此病并分离到病原。
埃利希体归属于立克次体目,埃利希体科,埃利希体属。埃利希体为专性细胞内寄生的革兰氏阴性小球菌,有时可见卵圆形、梭镖状以及钻石样等多种形态,平均长度为0.5~1.5pm。主要存在于宿主循环血液中的白细胞和血小板中。在宿主吞噬细胞的胞质内空泡中以二分裂方式生长繁殖,多个菌体聚在一起形成光镜下可见的桑葚状包涵体,也可单个存在于细胞的胞质内。用Romanovsky染色,埃利希体被染成蓝色或紫色,姬姆萨染色时菌体呈蓝色。埃利希体不能在无细胞的培养基或鸡胚中生长,部分埃利希体可以在脊椎动物细胞上培养增殖。埃利希体在培养细胞内一般生长缓慢,需经1~2周方能通过细胞涂片和染色在光镜下观察到包涵体,之后迅速繁殖,数天后细胞将被严重感染。
依据16SrRNA基因分析,可将埃利希体分为3个基因群:犬埃利希体群,包括犬埃利希体、查非埃利希体、伊氏埃利希体、鼠埃利希体和反刍考德里体嗜吞噬细胞埃利希体群,包括嗜吞噬细胞埃利希体、血小板埃利希体、马埃利希体和人粒细胞埃利希体;腺热埃利希体群,包括腺热埃利希体、立氏埃利希体。群内成员16S rRNA基因相似程度为97%?99.9%,而群间成员的相似程度为85%~93%。埃利希体属中对犬具有感染性的各个种及其主要特征见表1。
种名 | 自然感染宿主 | 感染靶细胞 | 主要传播媒介 | 地理分布 |
犬埃利希体 | 犬 | 单核细胞 | 血红扇头蜱 | 世界各地 |
查菲埃利希体 | 人、犬、鹿 | 单核细胞 | 美洲钝眼蜱变异革蜱 | 美国、欧洲 |
马埃利希体 | 马、犬、人、驼羊 | 粒细胞 | 太平洋硬蜱 | 美国、欧洲 |
伊氏埃利希体 | 犬 | 粒细胞 | 美洲钝眼蜱 | 美国 |
嗜吞噬细胞埃利希体 | 人、犬、食草动物 | 粒细胞 | 蓖子硬蜱 | 欧洲 |
立氏埃利希体 | 马、犬 | 单核细胞 | 不明 | 北美、欧洲 |
血小板埃利希体 | 大 | 血小板 | 不明 | 美国、欧洲 |
人粒细胞埃利希体 | 人、马、犬、啮齿类 | 粒细胞 | 肩突硬蜱 | 美国、欧洲 |
本病主要发生于热带和亚热带地区,已证明犬埃利希体群和嗜吞噬细胞埃利希体群成员主要以蜱作为储存宿主和传播媒介。通常情况下,蜱因摄食感染犬的血细胞而感染,尤其是在犬感染的头2?3周最易发生犬一蜱传播。带菌蜱在吸食易感犬血液时,埃利希体从蜱的唾液中进入犬体内。菌体在啤中可以进行经期传递(transstadial transmission),在感染啤体内可持续155d以上。因此,越冬的蜱可在来年感染易感犬,这种蜱是本病年复一年传播的主要保存贮主。
急性期后的病犬可带菌29个月,临床上用这些犬的血液给其他犬做输血治疗时,可将埃利希体病传给易感犬,这也是一条重要的传播途径。在一种非洲豺中曾发现埃利希体可存活112d。除家犬外,野犬、山犬、胡狼、狐等亦可感染该病。
夏季有蜱生活的季节较其他季节多发,该病主要在夏末秋初发生,多为散发,也可呈流行性发生。
人工感染犬埃利希体后,疾病的发展一般经过3个阶段,即急性期、亚临床期和慢性期。经过8~20d的潜伏期后,进入埃利希体病的急性阶段,此阶段持续2~4周。病菌在血液单核细胞和肝、脾、淋巴结中的单核吞噬组织内繁殖,引起淋巴结肿大、肝和脾淋巴网状内皮细胞增生。感染细胞通过血液转运到身体的其他器官,特别是肺、肾和脑膜等,感染细胞吸附于血管内皮引起脉管炎和内皮下组织感染。由于血小板被破坏引起血小板减少。由于红细胞生成受抑制以及红细胞破坏速度加快,逐渐出现贫血。
感染后6?9周进入亚临床感染阶段。此阶段不表现临床症状,主要特征是存在不同程度的血小板减少、白细胞减少和贫血。免疫能力较强的犬可以将寄生菌清除,较低的则逐渐进入慢性感染阶段。
根据犬的年龄、品种、免疫状况及病原不同有不同表现。
主要由犬埃利希体感染引起。急性阶段主要表现为精神沉郁、发热、食欲下降、嗜睡、口鼻流出黏液脓性分泌物、呼吸困难、体重减轻、淋巴结病、四肢或阴囊水肿。急性期的临床表现为短时性的,一般不经治疗,1?2周后恢复。通常在感染后10?20d出现血小板和白细胞减少。由于脑膜炎症或出血可引起不同程度的神经症状,如感觉过敏、肌肉抽搐。
大部分病例,急性期症状在1?2周后逐渐消失而进入亚临床阶段,在此阶段犬体重和体温恢复正常,但实验室检验仍然异常,如轻度血小板减少和高球蛋白血症。亚临床阶段可持续40?120d,然后进入慢性期。慢性期,病犬又可出现急性症状,如消瘦、精神沉郁。疾病发展及严重程度与感染菌株,犬的品种、年龄、免疫状态以及是否并发感染有关。幼犬致死率一般较成年犬高。
血液学检验,疾病早期可见病犬单核细胞增多,嗜酸性粒细胞几乎消失。随着病程的发展,贫血症状明显,表现为红细胞压积、血红蛋白和红细胞总数下降。
主要由伊氏埃利希体或马埃利希体引起。临床上表现为一肢或多肢跛行、肌肉僵硬、呈高抬腿姿势、不愿站立、拱背、关节肿大和疼痛,体温升高。血液学变化包括贫血、中性粒细胞减少、血小板减少、单核细胞增多、淋巴细胞增多以及嗜酸性粒细胞增多。
主要由血小板埃利希体感染引起。除个别病例出现前眼色素层炎之外,一般没有明显的临床表现。在感染后10~14d可引起埃利希体血症和血小板减少。血小板最低限可达2000~50000/μL,血小板凝血能力低下。
犬埃利希体感染病例剖检可见贫血、骨髓增生,肝、脾和淋巴结肿大,肺有淤血点。少数病例还可见肠道出血、溃疡,胸、腹腔积水和肺水肿等。
组织学观察,可见骨髓组织受损,表现为严重的泛白细胞减少,包括巨核细胞发育不良和缺失,正常窦状隙结构消失。慢性感染病犬,骨髓组织一般正常。以嗜中性粒细胞炎症反应为主的多关节炎是粒细胞性埃利希体病的主要特征。
根据临床症状、流行病学可做出初步诊断,确诊需结合血液学检验、生化试验、病原分离和鉴定、血清学试验等。
由于埃利希体数量少,而且包涵体的出现往往为一过性,所以血液涂片染色检出率较低。取离心抗凝血液白细胞层涂片,可以提高感染白细胞的检出率。胞浆包涵体姬姆萨染色呈蓝紫色。发热期进行活体检验,可在肺、肝、脾内发现犬埃利希体。以新鲜病料接种易感犬能够成功地复制本病。
犬埃利希体感染缺乏特征性临床症状,血液中病菌检验比较困难,一般采用间接免疫荧光技术(IFA)来进行诊断。多数犬感染7d后其血清中可查出特异性抗体。未经治疗犬在感染80d时抗体达到高峰,抗体水平一般在1:10?1:10240之间。IFA滴度在1:10即可以判为阳性。也可用IFA对血红扇头蜱的中肠组织进行染色,检验犬埃利希体的存在。
PCR基因扩增技术是目前埃利希体病原学诊断最有效的方法之一。根据埃利希体16S?rRNA基因的特异性碱基序列设计的引物扩增其特异性片段,可以大大提高检测的敏感性。
有的学者应用犬腹腔内巨噬细胞培养技术进行犬埃利希体病病原分离和诊断,已获得成功。
及时隔离病犬,及时治疗。常选用四环素类抗生素治疗,可按每千克体重22mg,口服,3次/d应注意用药持续时间,如果治疗见效,至少应持续3?4周。对慢性病例,可能要持续8周。除了抗生素治疗以外,应配合一定的支持疗法,尤其是慢性病例。
病愈犬往往能抵抗犬埃利希体再次感染。有人认为间接荧光抗体的滴度与保护性有着直接关系。由于目前还缺乏有效的疫苗可供应用,消灭其传播和储存宿主^啤就成为关键。但由于血红扇头蜱宿主范围太广,故将其完全消灭尚有一定困难。
对IFA阳性犬应进行治疗,直到检验阴性才能混群饲养。每隔6?9个月做1次血清学检验,这样才能很好地控制本病。
有人应用药物预防已取得成效。方法是口服长效四环素,6.6mg/kg体重,1次/d,在蜱的生活周期内连续用药,即可预防感染。另外,应该注意,临床治疗中作为供血用犬应是血清学反应阴性。
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